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在生物相關的研究實驗中,研究人員經(jīng)常需要對DNA進行提取分析以便快速有效地判斷生物種類,對基因組織成分進行深入分析。如何從細胞中提取DNA且不破壞結(jié)構(gòu),這就需要到蛋白酶K的幫助,它能有效分解細胞當中的所有蛋白質(zhì),將細胞核中的DNA完整釋放。
蛋白酶K結(jié)構(gòu)圖|來源于網(wǎng)絡
蛋白酶K(Proteinase K)是從真菌林伯氏白色念球菌中分離出的高活性絲氨酸蛋白酶,是現(xiàn)有蛋白酶中活性較高的品種,pH活性范圍為4-12,溫度范圍達0-75℃,甚至在SDS、尿素或EDTA存在的情況下依舊保持活性。它切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,可以降解所有蛋白質(zhì)。
蛋白酶K可作用于多種蛋白,在臨床實踐中,利用蛋白酶K進行標本的預處理,提高核酸提取效率,從而提高陽性標本檢出率是常用的方法。在病毒核酸提取檢測中發(fā)揮著多重作用:裂解病毒的外殼蛋白,暴露核酸分子;降解與核酸緊密結(jié)合的組蛋白;防止病毒RNA的降解等。
尤其是應對復雜樣本,諸如痰液樣本,其中存在著一些可抑制PCR反應物(如糖蛋白,免疫球蛋白等物質(zhì)就是PCR的抑制物),使用了蛋白酶K可較大程度清除該類物質(zhì),保證PCR結(jié)果準確性;同時樣本中可能殘留較多的RNA酶,蛋白酶K即可大程度滅活RNA酶,防止病毒RNA的降解。
本產(chǎn)品來源于表達經(jīng)過定點突變優(yōu)化的林伯氏白色念球菌(Engyodontium album)蛋白酶K基因的畢赤酵母,具有比活性高、產(chǎn)量高及更廣的溫度/pH值活性范圍等優(yōu)勢。先進的蛋白質(zhì)工程技術及28,000升酵母平臺有效單位成本,為生物醫(yī)藥研發(fā)與生產(chǎn)提供高性價比的蛋白酶K。酵母高效表達和色譜純化保證了產(chǎn)品的純度,本產(chǎn)品不含細菌內(nèi)毒素,應用范圍比天然蛋白酶K更廣泛。
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去除核酸酶和其它蛋白污染:應用于基因診斷試劑盒、基因組DNA提取試劑盒、RNA提取試劑盒中。
生物制藥工業(yè):提取核酸、多糖類藥物等非蛋白類生物制品,例如DNA疫苗和肝素的制備。
化妝品領域:可用于皮膚保健去除老化角質(zhì)層細胞以及鞣皮。
日用工業(yè)領域:制備水解蛋白調(diào)味品、飼料加工等行業(yè)領域。
結(jié)語:蛋白酶K應用范圍廣泛,除了醫(yī)療診斷及科研領域,它在其他行業(yè)也有著獨特作用:如造紙、工業(yè)制革、飼料生產(chǎn)、食品加工、化妝品等行業(yè)??戳艘陨辖榻B,您是否對蛋白酶K有所了解了呢~