核糖核酸酶(RNase)在生物體內(nèi)起著重要的作用，幾乎可以從任何一種原核生物與真核生物細(xì)胞中找到它的存在。它們具有降解和分解核糖核酸(RNA)分子的能力，參與調(diào)控細(xì)胞內(nèi)的RNA代謝和功能調(diào)節(jié)。根據(jù)其結(jié)構(gòu)和功能特點(diǎn)，核糖核酸酶可以分為多個(gè)分類(lèi)，如核糖核酸酶P(RNase P)、核糖核酸酶L(RNase L)等。

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核糖核酸酶A(RNase A)是核糖核酸酶家族中具代表性的成員之一。它早期從牛胰腺組織中分離得到，并被廣泛研究。RNase A具有高度特異性和高效性的RNA降解能力，通過(guò)切割RNA分子來(lái)調(diào)控細(xì)胞內(nèi)的RNA代謝功能。

Part.01?諾貝爾獎(jiǎng)與核糖核酸酶A

對(duì)于生物化學(xué)專(zhuān)業(yè)的人來(lái)說(shuō)Anfinsen經(jīng)典的核糖核酸酶變性和自復(fù)性實(shí)驗(yàn)想必并不陌生。安芬森(Christian B. Anfinsen)，美國(guó)生物化學(xué)家，因?qū)颂呛怂崦?，特別是氨基酸序列與其生物活性構(gòu)象之間關(guān)系的研究與摩爾(Stanford Moore)、施泰因(William H. Stein)共享1972年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。

牛胰核糖核酸酶A能夠被高濃度尿素和還原劑（巰基乙醇）徹底地變性。還原劑打開(kāi)了核糖核酸酶分子內(nèi)部4對(duì)二硫鍵的共價(jià)連接，尿素破壞了維系蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的疏水相互作用，從而將酶從其穩(wěn)定結(jié)構(gòu)變性為伸展的多肽鏈。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)是其活性和功能的前提，所以完全伸展的核糖核酸酶多肽鏈徹底喪失了催化活力。但是，當(dāng)從反應(yīng)體系中去除尿素和還原劑后，完全變性的多肽鏈會(huì)自發(fā)地重新折疊形成天然的構(gòu)象，同時(shí)恢復(fù)其催化活力。在這個(gè)復(fù)性過(guò)程中，酶分子的8個(gè)半胱氨酸殘基必須形成其天然構(gòu)象中原有的4對(duì)二硫鍵。從數(shù)學(xué)概率計(jì)算，8個(gè)半胱氨酸殘基隨機(jī)配對(duì)形成4對(duì)二硫鍵的組合共有105種，形成天然構(gòu)象中的4對(duì)二硫鍵形式的概率是1/105。

在安芬森這一實(shí)驗(yàn)中，多肽鏈沒(méi)有依靠任何其他輔助因素就找到了這1/105可能的天然構(gòu)象，說(shuō)明尿素破壞的蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的弱相互作用對(duì)二硫鍵的正確形成以及天然構(gòu)象的實(shí)現(xiàn)至關(guān)重要。正是基于這一經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，安芬森提出多肽鏈氨基酸序列含有其三維結(jié)構(gòu)的全部信息。安芬森的工作開(kāi)創(chuàng)了近代蛋白質(zhì)折疊研究的新時(shí)代，這個(gè)著名的實(shí)驗(yàn)也被載入世界上多本經(jīng)典生物化學(xué)教科書(shū)。

Part.02 結(jié)構(gòu)與功能

RNase A是一種核糖核酸內(nèi)切酶，可以特異地攻擊RNA上嘧啶殘基的3’端，切割與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵。反應(yīng)終產(chǎn)物是嘧啶-3′-磷酸及末端帶嘧啶-3′-磷酸的寡核苷酸。

應(yīng)用

· 去除DNA或蛋白質(zhì)樣品的RNA污染

·?為DNA純化提供支持

·?RNA檢測(cè)- RNA酶保護(hù)分析法中應(yīng)用

RNase A 適用于作用單鏈RNA。推薦工作濃度為10-20μg/mL，兼容于各種反應(yīng)體系。

Part.03 金普諾安|核糖核酸酶A

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金普諾安自主研發(fā)生產(chǎn)的核糖核酸酶A（Ribonuclease A/RNase A）是經(jīng)過(guò)蛋白質(zhì)工程技術(shù)改造的源于牛胰腺（bovine pancreas）的非特異性核糖核酸內(nèi)切酶，經(jīng)過(guò)酵母表達(dá)、純化獲得。它不含有原核生物表達(dá)的細(xì)菌內(nèi)毒素。

Part.04 產(chǎn)品信息